第一节 病毒性肝炎病原学指标测定

    目前已确定的病毒性肝炎病原体有5种，即甲型肝炎病毒(hepatitis A virus，HAV)、乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)、丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)、丁型肝炎病毒(hepatitis Dvlrus，HDV)、戊型肝炎病毒(hepatitis E virus，HEV)、除HBV为双链DAN病毒外，其余均为单链RNA病毒。

    抗HAV抗体测定(anti-hepatitis A virus，anti-HAV）

    HAV属于小RNA病毒科，为嗜肝RNA病毒，在体内主要在肝细胞内进行复制，通过粪一口途径传播，多数学者认为HAV不存在慢性携带状态。

    ELISA法：抗HAV-IgM阴性；抗HAV-IgG阴性或阳性。

    血清中抗HAV-IgM在发病1~2w内出现，3m后滴度下降，6m后则不易测出，抗HAV-IgM阳性已被公认为是早期诊断甲型肝炎的指标。抗HAV-IgG出现较抗HAV-IgM稍晚，可长期或终身存在，抗HAV-IgC阳性表示既往感染，但体内已无HAV，是一种保护性抗体，可用于检测机体或注射甲肝疫苗后是否具有对HAV的免疫力以及流行病学调查。

    1．ELISA法影响因素较多，标本要防止溶血，因红细胞中含有 过氧化物酶，红细胞裂解后造成标本溶血，易造成假阳性。

    2．要注意hook效应，即标本含量过高时，由于抗原一抗体比例不合适，易出现假阴性结果。

    3．抗心律失常药物，如普鲁卡因胺、肼苯达嗪，异烟肼，苯妥英钠，保泰松等药物可引起假阳性。

    4．洗涤次数要适当，防止洗涤不彻底致假阳性或洗涤过多致假阴性，要严格按照试剂盒说明书要求进行操作。

    乙型肝炎病毒(HBV)病原学指标测定

    HBV属于有包膜的嗜肝DNA病毒科，血循环中与HBV有关的颗粒从形态上至少可分为三类：1小球形颗粒并非完整的HBV，而是病毒的外壳（或称包膜），由脂蛋白构成，是乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的主要成分，HBsAg由于在肝细胞内参与装配Dane颗粒后过剩，游离于外周血，本身无传染性。2管形颗粒实际为一串聚合的小球形颗粒，直径与小球形颗粒相近，具有HBsAg特性。

    3大球形颗粒即完整的HBv，又称为Dane颗粒，由外壳和核壳组成。核壳内古有环状双股DNA、DNA多聚酶、核心抗原(HBcAg)、e抗原(HBeAg)等，是病毒复制的主体。

    HBV主要通过血液途径传播，也可通过母婴等途径传播。一般机体感染HBV后产生3种抗原抗体系统：HBsAg和乙型肝炎表面抗体(抗HBs)、HBeAg和乙型肝炎e抗体(抗-HBe)、HBcAg和乙型肝炎核心抗体(抗-HBc)。

    乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B virus surface antlgen，HBsAg)

    HBsAg存在于HBV的外壳，是一种糖蛋白，为大、小球形颗粒和管状颗粒所共有。HBsAg的抗原性较复杂，采用血清学方法分类古有5种不同的抗原表位，分别为a、d、y、w、r'其中a属于特异性共同抗原决定簇。目前已知有10种亚型，最常见的主要有adr、adw、ayw、ayr等4种，各亚型分布有明显的地区性，我国长江以北 以adr为主，长江以南以adr和adw为主，新疆、西藏、内蒙古等少数民族地区主要为ayw，因此HBsAg亚型对乙型肝炎流行病学调查和预防有一定意义。

    ELISA法：阴性。

    参见抗HAV抗体测定中ELISA法。

    HBsAg -般在感染HBV后1~2m内出现于血清中，短时在2w内即能够检出，可维持数周、数月、数年以至长期携带。HBsAg虽然本身不具有传染性，但由于其常与HBV同时存在，因此HB-sAg阳性时常被用作传染性的标志之一。HBsAg阳性见于乙肝潜伏期和急性期、慢迁肝、慢活肝、肝硬化、肝癌、慢性HBsAg携带者等。血清HBsAg仅为HBV感染的标志，不反映有无复制、复制程度、传染性强弱及预后等情况。

    乙型肝炎病毒表面抗体／抗-HBs (hepatitis B virus surface antibody．HBsAb)

    抗-HBs是机体针对HBsAg产生的一种保护性抗体，表明对HBV具有一定免疫力。一般情况下，抗-HBs在HBsAg消失后出现，多为IgG，少数患者中有IgM，是疾病恢复的开始，可持续多年，其滴度与特异性保护作用相关。

    ELISA、法：阴性。

    参见抗HAV抗体测定中EUSA法。

    抗HBs阳性见于既往感染HBV现已恢复，且对HBV有一定免疫力，接种乙肝疫苗后，仅出现单项抗-HBs阳性；被动性获得 抗-HBS抗体，如注射特异性Ig或输血等。

    抗-HBs和HBsAg可同时出现在HBV感染恢复期，此时 HBsAg尚未消失，而抗HBs已产生；或是s区基因发生变异，野株 抗-HBs不能将其中和清除；或是抗-HBs阳性者感染了免疫逃逸 株。HBsAg、抗-HBs和抗-HBc同时存在多见于暴发性肝炎患者。

    乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B virus e antigen．HBeAg) HBeAg位于HBV的核心部分，是一种可溶性抗原，由感染的 肝细胞分泌入血，在血中可游离存在。

    ELISA法：阴性。

    参见抗HAV抗体测定中ELISA法。

    1．急性HBV感染时HBeAg出现稍晚于HBsAg，消失先于 HBsAg，长期存在提示病情趋于慢性化。在慢性HBV感染时 HBeAg是主要的免疫耐受因子，大部分情况下HBeAg存在表示患 者处于高感染低应答状态。

    2．HBeAg阳性常见于HBsAg阳性者，患者血清中含有较多的 HBV颗粒，由于HBeAg与HBV DNA密切相关，因此是HBV复制 活跃且有较强传染性的标志；HBeAg持续阳性的乙肝患者易转为 慢肝，HBeAg和HBsAg同时阳性的孕妇可发生HBV母婴垂直传 播。

    乙型肝炎病毒e抗体，抗-HBe(hepatitis B virus e antibody， HBeAb)

    抗-HBe是在HBeAg消失后，机体所产生的一种非保护性抗 体，抗-HBe阳转表示病毒复制多处于静止状态，但并不代表病毒 复制停止或无传染性，20%~50%患者仍可检测到HBV DNA。部分 患者可能由于前C区基因变异，导致不能形成HBeAg所致，一般情况下抗- HBe和HBeAg不会同时存在。抗- HBe出现早于抗-HBs，检出抗-Hbe提示传染性明显降低或相对降低。

    ELISA法：阴性。

    参见抗HAV抗体测定中ELISA法。

    1．抗-HBe出现的快慢与肝炎转归有关。在乙肝急性期出现抗-HBe，易发展为慢性乙肝；慢性活动肝炎出现抗-HBe可能进展为肝硬化；若HBsAg阳性伴有抗-HBe，且ALT升高，须注意原发性肝癌的可能性。

    2．抗-HBe阳性常伴抗-HBc阳性，检出率在慢性乙肝、肝硬化、肝癌患者有逐渐递增的现象，提示多数患者HBV感染时间较长。

    乙型肝炎病毒核心抗体，抗-HBc(hepatitis B virus core anti-body，HBcAb)

    HBcAg是位于HBV的核心部分，主要存在于被感染肝细胞的细胞核内，游离HBcAg在血清中含量极少，检测比较繁琐，一般不作为常规测定。抗-HBc是针对HBcAg而产生的非保护性抗体，主... -->>
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